供應商 | 上海篤瑪生物科技有限公司 店鋪 |
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認證 | |
報價(jià) | 人民幣 2400.00元每盒 |
關(guān)鍵詞 | 可定制,人ELISA試劑盒,酶聯(lián)試劑盒,90分鐘一步法 |
所在地 | 上海市寶山區河曲路118號6981室 |
兔巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒
要求
做好對照
正式試驗時(shí),應分別以陽(yáng)性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以實(shí)驗結果的準確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特反應,可采用羊、兔或BSA等封閉。
實(shí)驗條件的選擇
在ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多可作為固相載體,如聚氯、聚、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應,觀(guān)察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被(或抗原)的選擇:將(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時(shí),觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇OD而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記工作濃度的選擇:用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標記部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是、安全、有明顯地顯色反應,而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
進(jìn)口分裝:
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(cháng)久性不是很好。
試劑盒的曲線(xiàn)
試劑盒的曲線(xiàn)相關(guān)系數R≥0.98。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測及酶結合物的稀釋度(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,實(shí)驗結果的重復性。
白介素6是一種細胞因子,已被證實(shí)為B細胞分化因子.它是一種形成,它的特性,如肝細胞急性蛋白合成的誘導和基于和白介素3協(xié)同作用的等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6與病理學(xué)存在的相關(guān)關(guān)系.例如,報道多種的生長(cháng)因子為白介素-6, 瘤細胞能合成白介素-6并表達白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性和自身發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測小鼠和細胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運用了兩種特,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測范圍 10.94的 700 pg/mL 預期用途
elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出數據為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明的準確度。比如水中總無(wú)機氯含量測定,樣品水中含有無(wú)機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機氯樣品,測定時(shí)忽略體積變化,如果測定出樣品中無(wú)機氯為29.8mg/L,則認為回收率為99%。
測定技術(shù)的基礎在于抗原之間的特異結合反應,所以任何的診斷試劑離不開(kāi)的原料,如抗原,酶等。以前用于測定的抗原通常為各種純化抗原,而則為純化抗原動(dòng)物后的多克隆和使用雜交瘤技術(shù)的單克隆,而抗原或的標記物如酶標結合物則通過(guò)各種化學(xué)合成制備。近年來(lái),隨著(zhù)分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程制備各種特殊的抗原或及其酶結合物等測定試劑幾成為現實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測定也不斷出現。
操作:
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽(yáng)性對照孔)。
3. 加酶標:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用觀(guān)察結果:反應孔內顏色越深,陽(yáng)性程度越強,陰性反應為無(wú)色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;
4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二(抗)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
6.一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。
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主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,標準品,生化試劑
上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的生物企業(yè)。 總部位于上海,并在全國設有經(jīng)銷(xiāo)或代理機構。產(chǎn)品因可靠而穩定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶(hù)為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎、以創(chuàng )新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有的研發(fā)和質(zhì)量檢測團隊以及的倉儲和物流系統?!昂V瑪生物”已經(jīng)得到全國科研工作者的認可,成為廣大經(jīng)銷(xiāo)商推崇的品牌。 公司擁有一批的研發(fā)人員,我們專(zhuān)注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng )新。產(chǎn)品覆蓋面廣,品質(zhì)可靠。先后開(kāi)發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、學(xué)、生物醫學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí),提供各種常規生化試劑,庫存常備產(chǎn)品多達10000多種,可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類(lèi)試劑。在質(zhì)量方面,謹記公司信念:質(zhì)量一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設有嚴謹的生產(chǎn)流程,科學(xué)的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序,我們恪守對每一位用戶(hù)的承諾:用的態(tài)度做的品牌。同時(shí),公司組建了一支的技術(shù)服務(wù)隊伍,能夠為科研工作者提供的技術(shù)服務(wù)。每一位購買(mǎi)篤瑪生物產(chǎn)品的用戶(hù)都能夠得到的咨詢(xún)和完善的售后服務(wù)。
王不留行環(huán)肽B
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產(chǎn)品名:標準品
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產(chǎn)品名:標準品
決明子苷B2
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甘松香酮H
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β,β’-二甲基丙烯酰阿卡寧
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產(chǎn)品名:標準品
巍瑞森醌
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高二氫辣椒素I
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產(chǎn)品名:標準品
紫葳新苷II(99%)
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產(chǎn)品名:標準品