供應商 | 上海聯(lián)祖生物科技有限公司 店鋪 |
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認證 | |
報價(jià) | 人民幣 4490.00元每盒 |
關(guān)鍵詞 | PCR鑒定試劑盒,蜈蚣探針?lè )≒CR,蜈蚣探針?lè )ㄔ噭┖? |
所在地 | 上海市嘉定區嘉羅公路1661 |
2年
PCR檢測試劑盒有效期一般為1年,這是指在適當的儲存溫度下。核酸擴增部分的試劑一般要貯存于-20℃下,產(chǎn)物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復凍融。上海
產(chǎn)品名稱(chēng):蜈蚣探針?lè )≒CR鑒定試劑盒
英文名稱(chēng):Scolopendra
產(chǎn)品貨號:LZ-P2849
分類(lèi):PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門(mén)。
【結果分析條件設定】
u 基線(xiàn)(Baseline)設定:應選擇該次實(shí)驗指數擴增前所有樣本熒光信號比較穩定的一段區域(所有樣本熒光信號無(wú)較大波動(dòng)),起始點(diǎn)(Start)應避開(kāi)熒光采集起始階段的信號波動(dòng),終止點(diǎn)(End)應比早出現指數擴增的樣本Ct值減少1~3個(gè)循環(huán),建議基線(xiàn)設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線(xiàn)設定在剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴增曲線(xiàn)的高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
1.蜈蚣探針?lè )≒CR 陰性質(zhì)控品的檢測結果應為陰性,無(wú)指數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct;
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測結果應為陽(yáng)性,有明顯的指數擴增期,Ct值應小于等于35;
3. 以上要求需在一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足,否則該次實(shí)驗視為無(wú)效。
【結果判斷】
1. 陽(yáng)性:有明顯的指數擴增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數擴增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數擴增期,則判定為陽(yáng)性,否則判定為陰性;
3. 陰性:無(wú)指數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性樣本。
PCR反應的特異性決定因素為:
?、僖锱c模板DNA特異正確的結合;
?、趬A基配對原則;
?、跿aq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;
?、馨谢虻奶禺愋耘c保守性。
蜈蚣探針?lè )ㄔ噭┖衅渲幸锱c模板的正確結合是關(guān)鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出一個(gè)靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時(shí)完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
PCR檢測步驟:
1、樣品處理
1)按照GB 4789.10-2016(或SN/T 1870-2016),取樣品25g(mL),加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無(wú)菌容器中均質(zhì),調節pH至6.8±0.2。
2)36±1℃培養18-24h。
注:也可參考其他地方標準進(jìn)行樣品的前處理。
2、核酸提取
1)取40μL增菌液于裂解液管中,98℃或沸水浴10min。
2)冷卻至室溫,吸取上清備用或者置于-20℃保存。
3、反應體系配置
從試劑盒中取出SA預混液,充分融化,短暫離心,然后將陰性對照、樣品的DNA提取液、陽(yáng)性對照各取5μL分別加入PCR管中,蓋好管蓋,短暫離心,立即進(jìn)行PCR擴增反應。
4、PCR擴增
PCR管置于PCR儀上,推薦反應程序設定如下:反應體系為25μL,在第二步每個(gè)循環(huán)60℃時(shí)檢測熒光信號,檢測通道選擇FAM。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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